土壤酸性磷酸酶(S-ACP)試劑洗滌方法：

. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，在潔凈的吸水紙上拍干，每孔加洗滌液350μl，浸泡-2分鐘，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫；試劑或樣品配制時，均需充分混勻，并盡量避免起泡。

.加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?0μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品00μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜，37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體，甩干，每個孔中加入Detection Ab工作液 00μl(在使用前5分鐘內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜，37℃溫育小時。

3.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡-2分鐘，大約350μl /每孔，甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前5分鐘內(nèi)配制)00μl，加上覆膜，37℃溫育小時。

5.棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液00μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育5分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源，預(yù)熱儀器，設(shè)置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

磷酸化表皮生長因子受體抗體

磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體

磷酸化細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK抗體

磷酸化細胞轉(zhuǎn)錄因子ELK抗體

磷酸化雌激素受體α抗體

磷酸化真核翻譯起始因子4B抗體

真核翻譯起始因子4B抗體

磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體

磷酸化上皮細胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體

磷酸化真核翻譯起始因子4G抗體

表皮生長因子受體5抗體

電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽/黃素蛋白抗體